產(chǎn)品名稱：病毒 DNA 提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：TD315-50 (50 次反應(yīng))

TD315-200 (200 次反應(yīng))

產(chǎn)品亮點(diǎn)：

從血清，血漿，CSF,尿液，血液，唾液，口腔拭子，糞便等液體樣品中提取到小片段和大片段的病毒基因組 DNA。

無(wú)需使用蛋白酶 K 或者有機(jī)變性劑。

提取到的病毒 DNA 可應(yīng)用于 RT-PCR，高通量測(cè)序，雜交等實(shí)驗(yàn)。

選配的 DNA 保護(hù)劑可以在常溫下運(yùn)輸樣品并且滅活病毒。

產(chǎn)品特性：

1. 樣品來(lái)源：血漿，血清，培養(yǎng)物的上清液，CSF,全血，唾液，口腔拭子，糞便，尿液，及其保存在DNA/RNA保護(hù)劑中的樣品。

2. 樣品范圍：≤400µl。

3. DNA/RNA純度：高質(zhì)量的DNA/RNA可應(yīng)用于RT/PCR等敏感的下游實(shí)驗(yàn)。

4. DNA/RNA結(jié)合量：每個(gè)柱子可最多結(jié)合5µg的DNA。

5. 試劑盒內(nèi)提供的DNA/RNA保護(hù)劑可穩(wěn)定核酸并在常溫下運(yùn)輸，保護(hù)劑可有效裂解細(xì)胞并且滅活病毒。

6. 提取到高質(zhì)量病毒DNA可應(yīng)用于NGS，RT/PCR等實(shí)驗(yàn)。

溶液制備：（使用之前需要配制）

添加β-巰基乙醇到 病毒 DNA/RNA 裂解液 中，終濃度為 0.5%（可選）

例如：125µl 到 25ml 中，500µl 到 100ml 中。

添加 24 ml 100%的乙醇（26 ml 95%的乙醇）到 6 ml 的病毒洗滌液 中。

添加 96 ml 100%的乙醇（102 ml 95%的乙醇）到 24 ml 的病毒洗滌液 中。

加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記，以免多次加入

操作步驟：

提示：所有離心步驟均在室溫 10，000-16,000 x g 下進(jìn)行

第一次使用前請(qǐng)先確認(rèn)病毒洗滌液中已經(jīng)添加乙醇!

以下步驟是針對(duì) 400μl 以內(nèi)體液設(shè)計(jì)的。體系可根據(jù)實(shí)際樣品量等比例調(diào)整。

首先需要去除樣品中的沉淀或不溶物，離心 1 分鐘，然后將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的無(wú)核酸酶的管子中。

如果樣品是血清，血漿，CSF,唾液，尿液等生物液體，從此步開始。

1. 添加 100μl 的 DNA/RNA 保護(hù)劑（2X）到每 100μl 樣品中，混勻。如果樣品是細(xì)胞懸液，全血，或已經(jīng)添加了 DNA/RNA 保護(hù)劑的樣品(口腔拭子，樣品保存管等)，從此步開始。

2. 添加 600μl 的病毒 DNA/RNA 裂解液到每 200μl 的混合液中，混勻。

3. 將上述混合物加入一個(gè) 1 號(hào)純化柱中，1 號(hào)純化柱套在收集管內(nèi)，離心 2 分鐘，倒掉濾出液，將 1 號(hào)純化柱套在一個(gè)新的收集管內(nèi)。

4. 添加 500μl 病毒洗滌液到柱中并且離心 1 分鐘，重復(fù)此步驟。

5. 確保去除洗滌液的殘留，然后將 1 號(hào)純化柱轉(zhuǎn)移到一個(gè)無(wú) DNase/RNase 的離心管中。

6. 在吸附膜的中間部位加 6-10µl 無(wú) DNA 酶/RNA 酶水（事先在 65－70℃水浴中加熱效果更好），離試問(wèn)放置 1 分鐘，離心 30 秒洗脫 DNA。

7. 洗脫下來(lái)的病毒 DNA 可以馬上進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)，或放置在-70℃?zhèn)溆谩?/p>

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