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百奧益康通用細胞碎片去除試劑盒BA3304:3步實現>90%碎片清除率

更新時間:2026-02-26點擊次數:195
  在單細胞測序、原代細胞培養(yǎng)等高精度實驗中,細胞碎片污染是導致數據偏差的核心風險。百奧益康通用細胞碎片去除試劑盒(貨號BA3304),通過密度梯度離心-選擇性裂解技術,可在20分鐘內清除樣本中90%以上的細胞碎片與雜質,為下游實驗提供高純度細胞懸液。
 
  一、技術原理:雙機制協(xié)同凈化
 
  1.溫和裂解:DRS緩沖液選擇性裂解破損細胞,釋放的DNA碎片形成網狀結構包裹雜質
 
  2.密度分層:通過3000×g梯度離心,形成三層結構:
 
  上層:含細胞碎片與蛋白聚集體
 
  中層:網狀DNA-雜質復合物
 
  底層:完整目標細胞
 
  3. 精準去除:移除上中兩層,保留底層高活力細胞(活性損失<5%)
 
  二、標準化操作流程(25分鐘完成)
 
  1.樣本預處理
 
  將細胞懸液經300×g離心5分鐘,用3.1 mL含5% FBS的PBS重懸
 
  2.DRS緩沖液處理
 
  加入900 μL DRS緩沖液,輕柔吹打混勻10次,避免渦旋振蕩
 
  3.梯度離心分層
 
  沿管壁緩慢加入4 mL PBS覆蓋液層,3000×g水平離心20分鐘(啟用離心機緩升緩降模式)
 
  4.碎片層去除
 
  分層后依次吸取:
 
  ? 上層4 mL PBS
 
  ? 中層DRS-碎片復合物
 
  保留底層細胞沉淀
 
  5.細胞回收
 
  用含5% FBS的PBS重懸細胞,經20 μm濾網過濾,即獲高純度懸液
 
  三、性能驗證數據
 
  · 碎片清除率:92.3% ± 4.1%(流式細胞術檢測)
 
  · 細胞回收率:85%以上(與初始活細胞數正相關)
 
  · 活性保持:處理前后細胞活性差異<3%(臺盼藍檢測)
 
  · 兼容性驗證:適用于PBMC、腫瘤浸潤淋巴細胞、干細胞等多種樣本
 
  四、三大應用場景突破
 
  1.單細胞測序前處理
 
  ◎ 碎片殘留率<5%,滿足10X Genomics Chromium系統(tǒng)建庫要求
 
  ◎ 有效提mRNA捕獲效率(較未處理組提升30%)
 
  2. 原代細胞培養(yǎng)
 
  ◎ 去除凋亡細胞碎片,將原代成纖維細胞增殖速度提升2倍
 
  ◎ 降低支原體污染風險(碎片攜帶微生物減少80%)
 
  3. 流式細胞分選
 
  ◎ 前向散射/側向散射圖背景信號降低至處理前的1/4
 
  ◎ 提高罕見細胞亞群檢測靈敏度(如循環(huán)腫瘤細胞檢出限達0.01%)
 
  選擇BA3304的四大優(yōu)勢
 
  ? 廣譜適用:兼容人/小鼠/大鼠等哺乳動物細胞
 
  ? 極簡操作:無需特殊設備,標準離心機即可完成
 
  ? 成本可控:單次處理成本僅為流式分選的1/10
 
  ? 靈活拓展:可搭配BA3311紅細胞裂解液同步去除非核細胞
 
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