一、alzet微量滲透泵操作第一階段：實驗設(shè)計與準(zhǔn)備（術(shù)前1-2天）
 

　　選擇泵型號：根據(jù)實驗持續(xù)時間(如2周選1002，4周選1004)和所需流速選擇。

 

　　計算藥物濃度：
 

　　緩釋泵藥物濃度計算要根據(jù)每天給藥量以及緩釋泵的泵送速率這兩個參數(shù)來計算給藥濃度，其中每天給藥劑量可根據(jù)事先查閱文獻(xiàn)確定。
 

　　此外，每批次緩釋泵的泵送速率會貼在包裝盒上，需要按照包裝上的速率進(jìn)行配藥。
 

　　濃度計算舉例：2001滲透泵，給藥：抗利尿激素 (ADH)，
 

　　1.查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只，或1.25ng/小時/只。然后，計算出完成1.25ng/小時 所需輸注量所需的ADH濃度：
 

　　ko = Q • Cd
 

　　其中 ko (µg/hr) 是質(zhì)量輸送速率，Cd (µg/µl) 表示藥物溶液濃度，Q (µl/hr) 表示泵的泵送速率。
 

　　2.2001型泵的 (標(biāo)稱) 泵送速率為 1 µl/hr (Q)，因此所需濃度 (Cd) 為：
 

　　Cd = 1.25 ng/hr = 1.25 ng/µl = 1.25 x 10-3 µg/µl
 

　　1 µl/hr
 

　　3. 2001型泵儲液體積(標(biāo)稱) 為 200 µl。為了達(dá)到所需的 1.25 x 10-3 µg/µl 濃度，應(yīng)在 200 µl 中溶解的 ADH 量為：
 

　　m=c • v
 

　　(1.25 x 10-3 µg/µl) x 200 µl = 0.25 µg
 

　　綜上，為了模擬大鼠正常的 ADH 分泌量30 ng/天/只(或 1.25 ng/小時/只)，必須在溶液中配制濃度為 1.25 x 10-3 µg/µl 的 ADH 溶液。應(yīng)配制過量溶液，以保證泵填充期間的安全裕度。
 

　　二、alzet微量滲透泵操作第二階段：泵的填充與平衡（手術(shù)當(dāng)天，關(guān)鍵步驟）
 

　　填充泵：
 

　　在超凈臺內(nèi)操作。將泵的流量調(diào)節(jié)器朝上，用提供的專用填充管連接注射器。
 

　　將注射器針頭垂直插入填充管，緩慢平穩(wěn)地推動活塞，直到藥液從流量調(diào)節(jié)器末端流出1小滴。這確保了藥液充滿儲藥庫并排盡所有氣泡。

 

　　移開注射器，泵已準(zhǔn)備好。
 

　　注意：切勿先安裝流量調(diào)節(jié)器！必須先填充。
 

　　平衡(啟動泵，至關(guān)重要！)：
 

　　將填充好的泵立即放入一個裝有無菌生理鹽水的無菌離心管中。
 

　　將管子放入 37°C 培養(yǎng)箱中，平衡至少4-6小時(可過夜，不超過推薦時長)。
 

　　目的：讓泵在植入前就開始滲透過程，確保植入動物體內(nèi)后能立即以恒定速率給藥。跳過此步會導(dǎo)致初始24-48小時無給藥或速率不準(zhǔn)。
 

　　三、alzet微量滲透泵操作第三階段：動物手術(shù)植入
 

　　麻醉與備皮：對動物(小鼠/大鼠)進(jìn)行麻醉，剃除背部肩胛骨間的毛發(fā)，并進(jìn)行外科消毒。
 

　　制作皮下囊袋：
 

　　在背部中線皮膚上做一個約1cm(小鼠)或1.5cm(大鼠) 的小切口。
 

　　用鈍頭剪或止血鉗，從切口向動物頭部方向輕柔地分離皮下組織，形成一個足以容納泵的囊袋。
 

　　植入泵：
 

　　用無菌鑷子從平衡液中取出泵，用無菌紗布輕輕吸干表面液體。
 

　　將泵的流量調(diào)節(jié)器端朝向動物頭部，平滑地滑入囊袋深處。
 

　　注意方向：確保泵在囊袋內(nèi)可以自由移動，不受皮膚張力擠壓。
 

　　縫合：使用可吸收縫線或皮膚夾閉合皮膚切口。無需縫合囊袋。
 

　　術(shù)后護(hù)理：將動物置于溫暖墊料上單籠飼養(yǎng)，直至清醒，并監(jiān)測其恢復(fù)情況。
 

　　四、alzet微量滲透泵操作第四階段：可選步驟——導(dǎo)管連接（用于腦室、血管或局部給藥）
 

　　如果需要靶向給藥，需在泵和靶點之間連接導(dǎo)管。

 

　　連接導(dǎo)管：將導(dǎo)管的一端緊密套在泵的流量調(diào)節(jié)器出口上。
 

　　排氣：用注射器向?qū)Ч軆?nèi)注入少量無菌生理鹽水，排盡導(dǎo)管和接頭內(nèi)的所有氣泡。
 

　　植入與固定：將導(dǎo)管另一端植入目標(biāo)位置(如側(cè)腦室、靜脈)，并用顱骨螺釘(腦部)或組織膠(皮下)妥善固定導(dǎo)管。最后將泵按上述方法植入皮下。
 

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