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免疫細胞(ICC)實驗步驟有哪些?
2023-10-19
免疫細胞化學(ICC)是一種使用熒光抗體或染料來檢測細胞內(nèi)靶抗原的技術(shù)。那么你知道免疫細胞(ICC)實驗步驟有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、細胞培養(yǎng)/固定很多抗原在離體組織中只存在很短時間,自溶(autolysis)和壞死(necrosis)使得抗原進一步降解,組織形態(tài)和結(jié)構(gòu)被破壞。樣品浸泡在合適的固定液中,固定液完quan滲透組織,使蛋白失去活性,并且使組織被保存、穩(wěn)定在接近invivo狀態(tài)。二、通透處理通透即為對細胞膜進行打孔處理,使抗體能進入到細胞中和抗原發(fā)生結(jié)合。通...
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免疫組化實驗常見問題有哪些?
2023-10-19
免疫組織化學(immunohistochemistry,IHC)是一種綜合定性、定位和定量;形態(tài)、機能和代謝密切結(jié)合為一體的研究和檢測技術(shù)。在原位檢測出病原的同時,還能觀察到組織病變與該病原的關(guān)系,確認受染細胞類型,從而有助于了解疾病的發(fā)病機理和病理過程。那么你知道免疫組化實驗常見問題有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、石蠟切片再染色過程出現(xiàn)脫片現(xiàn)象1.烤片時間不夠,或溫度不夠,可以延長烤片時間和提高烤片溫度;2.用含有多聚賴氨酸的玻片,可以購買到或這自己做;3.有些組織本身就...
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二代測序(NGS)的原理
2023-10-18
DNA測序技術(shù)一直是分子生物學相關(guān)研究中常用的技術(shù)手段之一,從一定程度上推動了該領(lǐng)域的快速發(fā)展。每一代測序技術(shù)的更替都標志著生物學中基因芯片、數(shù)據(jù)分析、表面化學、生物工程等技術(shù)領(lǐng)域有了新的突破,使測序向著高通量、低成本、高安全性和商業(yè)化的方向發(fā)展。那么二代測序(NGS)的原理是什么?讓我們一起來看看吧!第二代測序(NGS)又稱為高通量測序(High-throughputsequencing),是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來的DNA測序技術(shù)。二代測序引入了可逆終止末端,從而實現(xiàn)...
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支原體污染的檢測方法有哪些?
2023-10-18
支原體污染一般在顯微鏡下不可見,很難察覺,但細胞會受到極大的損傷,主要通過以下途徑影響細胞生長及功能。那么支原體污染的檢測方法有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、分離培養(yǎng)法檢測方法:將待檢樣品接種到適合支原體生長的液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中,如有支原體污染,液體培養(yǎng)基顏色會改變,固體培養(yǎng)基將會有菌落生長。優(yōu)點:該方法被稱為支原體培養(yǎng)法的金標準,可以檢測絕大多數(shù)支原體。缺點:支原體生長到一定數(shù)量才能判斷是否有污染,檢測時間長,無法實現(xiàn)對支原體的快速檢測二、原位染色法檢測方法:通過染...
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細胞被支原體污染,該怎么辦?
2023-10-18
支原體是目前為止發(fā)現(xiàn)的最小的原核生物,支原體污染一般在顯微鏡下不可見,很難察覺,但細胞會受到極大的損傷,主要通過以下途徑影響細胞生長及功能。那么細胞被支原體污染,該怎么辦呢?讓我們一起來看看吧!一、支原體污染的來源1.環(huán)境污染:如細胞培養(yǎng)房、細胞培養(yǎng)箱、超凈工作臺內(nèi)已被支原體污染;2.實驗器材的污染:移液槍、移液管、細胞培養(yǎng)皿、水浴鍋等;3.細胞培養(yǎng)試劑的污染:培養(yǎng)基、胰酶、血清、細胞凍存液等;二、處理方法1.及時更換培養(yǎng)液:可以減緩支原體的污染,但不能wan全清除;2.使用...
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夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么?
2023-10-18
ELISA的原理是以免疫學反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。那么你知道夾心法與競爭法的ELISA檢測原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、夾心法原理夾心法使用的是兩個抗體夾抗原或者兩個抗原夾抗體的方法,這種復合物被稱之為三明治夾心結(jié)構(gòu),利用一對配對wan全的抗體,可以特異性檢測抗原,當然主要針對的是具有至少2個以上抗原表位的抗原,抗體的配對可是門技術(shù)活,很多公...
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直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么?
2023-10-18
在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。那么你知道直接法與間接法的ELISA檢測原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、直接法原理直接法是利用包被抗原,檢測抗體或者進行重組蛋白的活性驗證,利用蛋白與板材(即微孔板底)通過疏水鍵、流水/離子鍵的被動吸附,通過引入其它活性基團如氨基和碳基的共價結(jié)合,以及通過表面改性后的親水鍵結(jié)合等等,當然也有利用親和素預包被的板材,通過...
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細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些?
2023-10-17
你知道細胞凋亡與細胞壞死的不同點有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、定義細胞凋亡:細胞凋亡是一種正常的基因程序性細胞死亡,其中衰老細胞在其生命周期結(jié)束時收縮,其剩余片段被吞噬而沒有任何炎癥反應(yīng)。細胞壞死:壞死是由于存在外部因素(如真菌或細菌毒素)而產(chǎn)生的信號導致細胞過早死亡。二、誘導細胞凋亡:當細胞發(fā)出DNA損傷或促凋亡和抗凋亡蛋白失衡的信號時,它就會被誘導。細胞壞死:它是由感染、外傷和毒素等外部存在因素引起的。三、形態(tài)變化細胞凋亡:可能會發(fā)生膜出血,但會保持膜的完整性。細胞壞...