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ELISA實驗結果異常的因素有哪些?
2023-10-17
ELISA運用了免疫學原理和化學反應顯色原理,需要將抗原或抗體預包被在固相載體表面,使后來形成的抗原-抗體-酶(熒光基團)-底物復合物黏附在載體上,通過檢測OD值或發(fā)光值,來檢測靶蛋白的含量。ELISA適合用于定量檢測胞外的分泌性蛋白,檢測大分子抗原和特異性抗體等。那么ELISA實驗結果異常的因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、樣品樣品是檢測的前提,樣品質(zhì)量會直接影響實驗結果。可以用ELISA來檢測的樣品很多,根據(jù)檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等,但大部分還是以血...
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如何選擇ELISA試劑盒?
2023-10-17
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)技術從1970年代發(fā)展至今已近半個世紀,是一項實驗室最基本的免疫檢測技術,被廣泛的應用于基礎研究和臨床檢驗。那么面對市面上數(shù)以千計的試劑盒,數(shù)百家供應商,該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢?讓我們一起來看看吧!一、明確研究種屬一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬,且為shou個單詞,檢索種屬的常用語言為英文。如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的ELIS...
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ELISA樣本處理的注意事項有什么?
2023-10-17
ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據(jù),為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性,在實驗過程中必須堅持全面的質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制,在收集標本前都必須有一個完整的計劃。那么你知道ELISA樣本處理的注意事項有什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、每個樣本量收集體積=100ulx檢測種類,如果要做復孔,標本量收集體積=100ulx檢測種類x2。二、樣本收集后若在一周內(nèi)進行檢測可保存于2-8°C,若不及時檢測,請進行分裝,凍存于-20°或-80°C,避免反復凍融。三、試劑盒的檢測范圍不等同...
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蛋白檢測條帶的常見問題有哪些?如何解決?
2023-10-16
你知道在蛋白檢測中條帶的常見問題有哪些?該如何解決嗎?讓我們一起來看看吧!一、條帶出現(xiàn)位置比預期低或高①當條帶出現(xiàn)位置比預期低:原因:目的蛋白經(jīng)過剪切或降解,有相同或相似抗原表位的蛋白被抗體檢測出解決辦法:樣品準備時候要在冰上操作;加入更過蛋白酶抑制劑;更換別的抗體②當條帶出現(xiàn)位置比預期略高:原因1:蛋白可能被糖基化,或氨基酸基被修飾解決辦法:使用酶去除可能的蛋白修飾;檢查抗原序列原因2:可能有融合蛋白解決辦法:查看表達序列原因3:蛋白形成二聚體或多聚體解決辦法:加強變性條件...
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引物的純化方法有哪些?
2023-10-16
你知道引物的純化方法有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、脫鹽寡核苷酸合成后,為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結構,首先必須去除保護基團。通過濃氨水處理,合成的寡核苷酸從固相載體上分離,2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護基團,以及堿基的保護基團基(苯甲酰基和異丁基)被去除,從而形成了天然的DNA結構。然而,必要的去保護步驟完成后,寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機化合物。所有非必須有機化合物被移除的過程通常叫做脫鹽。脫鹽純化可以借助反向硅膠柱進行。盡管脫鹽純化可以移除所...
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培養(yǎng)基制備的注意事項有什么?
2023-10-13
培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關系到檢驗結果的準確性和可靠性,因此對于微生物檢驗而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。那么培養(yǎng)基制備的注意事項有什么呢?讓我們一起來看看吧!一、配制要求正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗的基礎。實驗人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時,要嚴格按照產(chǎn)品說明進行配制,并做好配制記錄。在配制過程中,實驗人員需要嚴格遵守相關操作標準,佩戴口罩進行操作,避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末,稱量、溶解應使用專門...
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PCR反應污染的處理方法有哪些?
2023-10-13
PCR反應的特點是具有較大擴增能力與靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。那么你知道PCR反應污染的處理方法有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、環(huán)境污染1.稀酸處理法:對可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤。2.紫外照射(UV)法:紫外波長(nm)一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是,選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時,要考慮PCR產(chǎn)物的長度與產(chǎn)物序列中堿基的分布,UV照射僅對500bp以上長片段有效...
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離心柱法提取DNA的實驗步驟與注意事項有哪些?
2023-10-12
離心柱上有硅膠濾膜,在高鹽低pH條件下,核酸能結合到硅膠膜上,而蛋白質(zhì)和其他代謝產(chǎn)物被洗脫;后續(xù)改變反應條件到低鹽高pH來洗脫純化DNA。用離心柱法來提取DNA,得到的DNA質(zhì)量好,純度和濃度較高。那么離心柱法提取DNA的實驗步驟與注意事項有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、實驗步驟1.平衡液預處理取一個新的吸附柱放在收集管中,懸空加入100μL的平衡液至離心柱中,12000rpm離心1min,倒掉收集管中的廢液,將離心柱放回收集管中,備用。2.處理材料(1)如提取材料為血液,...